vstispСадоводство и виноградарствоHorticulture and viticulture0235-25912618-9003Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»10.31676/0235-2591-2023-5-27-34akxazgvstisp-1087Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGYЭмбриокультура в селекции косточковых: особенности и успехи примененияEmbryo rescue in stone fruit breeding: specifics and application successhttps://orcid.org/0000-0002-2845-4253СпивакВ. В.SpivakV. V.

Спивак Владимир Валерьевич – младший научный сотрудник, аспирант, лаборатория репродуктивной биотехнологии 

ул. Загорьевская, 4, Москва, 115598

Vladimir V. Spivak, Junior Researcher, Graduate Student, Laboratory of Reproductive Biotechnology 

4, Zagorevskaya str., Moscow, 115598, Russia

fncsad@fncsad.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6172-9597БурменкоЮ. В.BurmenkoYu. V.

Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник 

ул. Загорьевская, 4, Москва, 115598

PhD Sci. (Biol.), Senior Researcher, 

4, Zagorevskaya str., Moscow, 115598, Russia

https://orcid.org/0000-0003-3629-4461КапитоваИ. А.KapitovaI. A.

Кандидат химических наук, старший научный сотрудник, заведующий лабораторией репродуктивной биотехнологии

ул. Загорьевская, 4, Москва, 115598

PhD Sci. (Chem.), Senior Researcher, Head of Laboratory of Reproductive Biotechnology

4, Zagorevskaya str., Moscow, 115598, Russia

Федеральный научный селекционно-технологический центр садоводства и питомниководстваРоссияFederal Horticultural Research Center for Breeding, Agrotechnology and NurseryRussian Federation202330112023052734Copyright © Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture», 20232023Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»https://www.sadivin.com/jour/about/submissions#copyrightNoticehttps://www.sadivin.com/jour/article/view/1087

Создание сортов косточковых культур, отвечающих современным требованиям производства – трудоемкий процесс, сопряжённый с низким выходом потомства, полученным от контролируемой внутривидовой и межвидовой гибридизации, который может длиться до 25 лет. Нежизнеспособность гибридных семян провоцируется абортированием зародыша, который не успевает завершить своё морфофизиологическое развитие, и отмиранием эндосперма у межвидовых гибридов. Сохранение гибридов с уникальными комбинациями признаков возможно при извлечении зародышей, полученных в результате межвидовых и межродовых скрещиваний, неспособных выжить in vivo или в ходе традиционных методов селекции растений на ранних сроках развития и помещения их для дальнейшего развития в условия in vitro. Цель исследования – на основе литературных источников проанализировать питательные среды, условия их применения и сроки изоляции зародышей в in vitro, для сохранения незрелых зародышей и создания гибридов косточковых культур; выявить наиболее эффективные схемы изоляции зародышей в in vitro для дальнейшего применения в селекционном процессе. Для аналитического обзора были использованы открытые источники, содержащие информацию о составе наиболее часто используемых питательных средах, их составах, модификациях, условиях применения, сроках введения зародышей в условия in vitro для персика обыкновенного (Prunus persica (L.) Batsch), абрикоса обыкновенного (P. armeniaca L.), сливы домашней (P. domestica L.), сливы китайской (P. salicina Lindl.), алычи (P. cerasifera Ehrh.), тёрна (P. spinosa L.), вишни обыкновенной (P. cerasus L.) и черешни (P. avium (L.) L.). Проведённый анализ исследований показал, что оптимальными средами для поддержания развития зародышей персика обыкновенного является модифицированная питательная среда Woody Plant (до 100 % сохраненных зародышей), для абрикоса обыкновенного – модифицированная Monnier (до 92,4 % сохраненных зародышей), для вишни обыкновенной, черешни, сливы и межвидовых гибридов различные варианты Murashige and Skoog (более 70 % сохраненных зародышей). В качестве регуляторов роста используются: 6-бензиламинопурин (6-БАП), гибберелловоя кислота (ГК), кинетин, НУК, а также углеводы, L-глутамин, хелат железа, аскорбиновая кислота, тиамин, глютаминовая кислота, триптофан, гидролизат казеина и др. Сроки введения в культуру in vitro варьируют в зависимости от культуры: от 28 (вишня обыкновенная) до 99 дней (персик обыкновенный). Стратификация при +4…+5 °С в темноте до начала развития способствует повышению выхода жизнеспособных зародышей. Оптимальный фотопериод для культивирования зародышей in vitro составляет 12 (персик обыкновенный) – 16 (алыча, вишня обыкновенная, черешня и межвидовые гибриды) часов. В результате отбора из гибридного фонда, полученного с использованием сохранения зародышей, в Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию, внесены 1 сорт персика обыкновенного (‘Крымский Шедевр’), 3 сорта черешни (‘Весняны Наспивы’, ‘Призерка’, ‘Услада’), районированные по Северо-Кавказскому региону; в реестр охраняемых селекционных достижений для Центрального региона 2 сорта сливы домашней (‘Тулица’ и ‘Величавая’).

The development of stone fruit varieties that meet modern production requirements is a labor-intensive process involving low yields of progeny obtained through controlled intraspecific and interspecific hybridization, which can take up to 25 years. The non-viability of hybrid seeds is caused by the abortion of the embryo that does not have time to complete its morphophysiological development and endosperm abortion in interspecific hybrids. It is possible to preserve hybrids having a unique combination of traits by removing embryos derived from interspecific and intergeneric crossing that are unable to survive in vivo or when using conventional methods for breeding embryos at early developmental stages and placing them under in vitro conditions for further development. On the basis of literary sources, the study aims to analyze growth media, conditions of their application, and time of embryo placement under in vitro conditions designed to preserve immature embryos and create hybrids of stone fruit crops, as well as to identify the most effective in vitro embryo isolation schemes for further use in the breeding process. The analytical review used open sources containing information on the composition of the most commonly used growth media, their compositions, modifications, application conditions, time of embryo placement under in vitro conditions for common peach (Prunus persica (L.) Batsch.), common apricot (P. armeniaca L.), common plum (P. domestica L.), Chinese plum (P. salicina Lindl.), cherry plum (P. cerasifera Ehrh.), sloe (P. spinosa L.), sour cherry (P. cerasus L.), sweet cherry (P. avium (L.) L.), as well as electronic scientific libraries (eLibrary, Scopus, and Google Scholar). The performed analysis of works revealed the following media as optimal for sustaining the development of embryos: common peach – modified growth medium Woody Plant (up to 100 % of preserved embryos); common apricot – modified Monnier (up to 92.4 % of preserved embryos); sour cherry, sweet cherry, plum, and interspecific hybrids – different variants of Murashige and Skoog (over 70 % of preserved embryos). The used modifiers include 6-benzylaminopurine (6-BAP), gibberellic acid (GA), kinetin, peracetic acid, carbohydrates, L-glutamine, iron chelate, ascorbic acid, thiamine, glutamic acid, tryptophan, casein hydrolysate, etc. The time of placement under in vitro conditions varies from 28 days (sour cherry) to 99 days (common peach) depending on the crop. Stratification in the dark at +4…+5 ℃ prior to development increases the yield of viable embryos. The optimal photoperiod for in vitro embryo cultivation ranges from 12 (common peach) to 16 (cherry plum, sour cherry, sweet cherry, and interspecific hybrids) hours. As a result of selection from the fund of hybrids obtained through embryo preservation, one common peach variety (Krymskii Shedevr) and three sweet cherry varieties (Vesnyany Naspivy, Prizerka, and Uslada), recommended for the North Caucasus region, were included in the State Register of Breeding Achievements approved for use; two common plum varieties (Tulitsa and Velichavaya) were included into the Register of Protected Breeding Achievements for the Central Region.

эмбриокультураin vitroпитательные средыкосточковые культурыгибридыembryo rescuein vitrogrowth mediastone fruit cropshybridsИсследования выполнены в рамках реализации государственного задания ФГБНУ ФНЦ Садоводства № 0432-2022-0001 «Воспроизводство и сохранение ценных генотипов плодовых и ягодных культур методами новых биотехнологий»The studies were carried out as part of implementing the state assignment No. 0432-2022-0001 of the Federal Horticultural Center for Breeding, Agrotechnology and Nursery “Reproduction and Conservation of Valuable Genotypes of Fruit and Berry Crops Using New Biotechnology Methods”ReferencesGötz L., Heigermoser M., Jaghdani T. J. Chapter 4: Russia’s food security and impact on agri-food trade. Russia’s role in the contemporary international agri-food trade system. 2022, 115137. https://doi.org/10.1007/978-3-030-77451-6_5Götz L., Heigermoser M., Jaghdani T. J. Chapter 4: Russia’s food security and impact on agri-food trade. Russia’s role in the contemporary international agri-food trade system. 2022, 115137. https://doi.org/10.1007/978-3-030-77451-6_5Кондратьева О. В., Федоров А. Д., Слинько О. В. Войтюк В. А., Воробьев В. Ф. Эффективность использования интенсивных технологий в садоводстве. Техника и оборудование для села. 2020;(12):44-46. DOI: 10.33267/2072-96422020-12-44-46Kondratyeva O. V., Fedorov A. D., Slinko O. V., Voytyuk V. A., Vorobiev V. F. Efficiency of using intensive technologies in gardening. Machinery and Equipment for Rural Area. 2020;(12):44-46. (In Russ.) DOI: 10.33267/2072-9642-2020-12-44-46FAO. Overview of the fruit and vegetable sector in Eurasian and Economic Union countries. Budapest. 2023, 98 p. https://doi.org/10.4060/cc4267enFAO. Overview of the fruit and vegetable sector in Eurasian and Economic Union countries. Budapest. 2023, 98 p. https://doi.org/10.4060/cc4267enСмыков А. В., Месяц Н. В. Анализ состояния садоводства и культуры персика в мире. Биология растений и садоводство: теория, инновации. 2020;(155):130-137. https://doi.org/10.36305/2712-7788-2020-2-155-130-137Smykov A. V., Mesyats N. V. State analysis of horticulture and peach culture in the world. Plant Biology and Horticulture: theory, innovation. 2020;(155):130-137. (In Russ.) https://doi.org/10.36305/2712-7788-2020-2-155-130-137Плаксина Т. В., Кульханова Д. С., Матькова Е. Ю. Культура изолированных зародышей in vitro в практической селекции вишни. Достижения науки и техники АПК. 2013;7:17-19.Plaksina T. V., Kulkhanova D. S., Matkova E. Yu. The culture of isolated embryos in breeding of cherry. Achievements of Science and Technology in Agro-Industrial Complex. 2013;7:17-19. (In Russ.)Carrasco B. et al. Breeding in peach, cherry and plum: from a tissue culture, genetic, transcriptomic and genomic perspective. Biological Research. 2013;46(3):219-230. http://dx.doi.org/10.4067/S0716-97602013000300001Carrasco B. et al. Breeding in peach, cherry and plum: from a tissue culture, genetic, transcriptomic and genomic perspective. Biological Research. 2013;46(3):219-230. http://dx.doi.org/10.4067/S0716-97602013000300001Collins G. B., Grosser J. W Culture of embryos. In: I. K. Vasil (ed.). Cell culture and somatic cell genetics of plants. Laboratory procedures and their applications. Academic, Orlando, Fla. 1984;1:241-257.Collins G. B., Grosser J. W Culture of embryos. In: I. K. Vasil (ed.). Cell culture and somatic cell genetics of plants. Laboratory procedures and their applications. Academic, Orlando, Fla. 1984;1:241-257.Rogo U., Fambrini M., Pugliesi C. Embryo Rescue in Plant Breeding. Plants. 2023;12(17):3106. https://doi.org/10.3390/plants12173106.Rogo U., Fambrini M., Pugliesi C. Embryo Rescue in Plant Breeding. Plants. 2023;12(17):3106. https://doi.org/10.3390/plants12173106.Рихтер Ал. А., Рихтер В. А., Рихтер Ан. А. Эмбриокультура растений в создании новых сортов. Научное достояние док. биол. наук А. И. Здруйковской-Рихтер: монография. Симфирополь: ИТ «Ариал», 2022, 332 с.Richter Al. A., Richter V. A., Richter An. A. Embryoculture of plants in the creation of new varieties. Scientific property doc. biol. Sciences A. I. Zdrujkowski-Richter: monograph. Simfiropol: IT “Arial”, 2022, 332 p. (In Russ.)Rizzo M. et al. Growth of immature peach [Prunus persica (l.) Batsch.] Embryos on different media. IV International Peach Symposium 465. 1997, 141-144. DOI: 10.17660/ActaHortic.1998.465.15Rizzo M. et al. Growth of immature peach [Prunus persica (l.) Batsch.] Embryos on different media. IV International Peach Symposium 465. 1997, 141-144. DOI: 10.17660/ActaHortic.1998.465.15Topp B. L. et al. Effects of Media and Fruit Ripeness on Germination and Transplanting of In Vitro Cultured Embryos from Low-Chill Peach and Nectarine. International Symposium on Harnessing the Potential of Horticulture in the Asian-Pacific Region 694. 2004:145-148. DOI: 10.17660/ActaHortic.2005.694.23Topp B. L. et al. Effects of Media and Fruit Ripeness on Germination and Transplanting of In Vitro Cultured Embryos from Low-Chill Peach and Nectarine. International Symposium on Harnessing the Potential of Horticulture in the Asian-Pacific Region 694. 2004:145-148. DOI: 10.17660/ActaHortic.2005.694.23Jeengool N., Boonprakob U. Rescue of peach embryo in culture media with additional of 6-benzylademine and gibberellic acid. Agriculture and Natural Resources. 2004;38(4):468-474.Jeengool N., Boonprakob U. Rescue of peach embryo in culture media with additional of 6-benzylademine and gibberellic acid. Agriculture and Natural Resources. 2004;38(4):468-474.Wan C. et al. Factors Affecting Embryo Rescue for the Different Ripening Stage in Peach (Prunus persica L. Batsch) [J]. Acta Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica. 2009;1.Wan C. et al. Factors Affecting Embryo Rescue for the Different Ripening Stage in Peach (Prunus persica L. Batsch) [J]. Acta Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica. 2009;1.Grigolo C. R. et al. Culture media and bap concentrations in the embryo culture of ‘BRS Kampai’peach. Revista Brasileira de Fruticultura. 2020(42). https://doi.org/10.1590/0100-29452020661Grigolo C. R. et al. Culture media and bap concentrations in the embryo culture of ‘BRS Kampai’peach. Revista Brasileira de Fruticultura. 2020(42). https://doi.org/10.1590/0100-29452020661Byrne D. H., Anderson N. Cool temperature during germination improves germination and survival of embryo cultured peach seed. V International Peach Symposium 592. 2001:25-27. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.592.1Byrne D. H., Anderson N. Cool temperature during germination improves germination and survival of embryo cultured peach seed. V International Peach Symposium 592. 2001:25-27. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.592.1González J., Infanter R. Early maturing peach embryo rescue and in vitro survival at different fruit growth stages. V International Peach Symposium 592. 2001:89-92. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.592.10González J., Infanter R. Early maturing peach embryo rescue and in vitro survival at different fruit growth stages. V International Peach Symposium 592. 2001:89-92. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.592.10Manzo Gonzalez A. et al. Rescue and in vitro culture of inmature embryos on peach (Prunus persica)”Flordaprince”. Serie Fitociencia. 1992.Manzo Gonzalez A. et al. Rescue and in vitro culture of inmature embryos on peach (Prunus persica)”Flordaprince”. Serie Fitociencia. 1992.Özdemir Eroğlu Z., Fidanci A., Misirli A. Erkenci şeftali embriyolarının farklı kültür ortamlarında gelişimi. 2012;18:93-99. DOI: 10.1501/Tarimbil_0000001196Özdemir Eroğlu Z., Fidanci A., Misirli A. Erkenci şeftali embriyolarının farklı kültür ortamlarında gelişimi. 2012;18:93-99. DOI: 10.1501/Tarimbil_0000001196Devi I., Singh H., Thakur A. Effect of developmental stage and medium on embryo culture of low chill peach hybrids. Current Science. 2017, 1771-1775.Devi I., Singh H., Thakur A. Effect of developmental stage and medium on embryo culture of low chill peach hybrids. Current Science. 2017, 1771-1775.Arahana V. S. et al. Efecto de la temperatura, medios de cultivo y reguladores de crecimiento en la germinación de embriones cigóticos de durazno (Prunus persica) var. Diamante. ACI Avances en Ciencias e Ingenierías. 2012;4(2).Arahana V. S. et al. Efecto de la temperatura, medios de cultivo y reguladores de crecimiento en la germinación de embriones cigóticos de durazno (Prunus persica) var. Diamante. ACI Avances en Ciencias e Ingenierías. 2012;4(2).Pinto A. C. Q., Rogers S. M. D., Byrne D. H. Growth of immature peach embryos in response to media, ovule support method, and ovule perforation. HortScience. 1994;29(9):10811083. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.29.9.1081Pinto A. C. Q., Rogers S. M. D., Byrne D. H. Growth of immature peach embryos in response to media, ovule support method, and ovule perforation. HortScience. 1994;29(9):10811083. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.29.9.1081Лесникова-Седошенко Н. П. и др. Применение биотехнологических методов в получении селекционных форм персика (Prunus persica (L.) Batch) и абрикоса (Prunus armeniaca L.). Биология растений и садоводство: теория, инновации. 2007;128:33-40.Lesnikova-Sedoshenko N. P. et. al. Using of biotechnology methods for obtaining of peach (Prunus persica (L.) Batch) and apricot (Prunus armeniaca L.) selection forms. Plant Biology and Horticulture: theory, innovation. 2007;128:33-40. (In Russ.)Srivastav M. et al. Embryo culture studies in subtropical peach (Prunus persica Batsch.). VII International Symposium on Temperate Zone Fruits in the Tropics and Subtropics 662. 2003, 297-301 DOI: 10.17660/ActaHortic.2004.662.43Srivastav M. et al. Embryo culture studies in subtropical peach (Prunus persica Batsch.). VII International Symposium on Temperate Zone Fruits in the Tropics and Subtropics 662. 2003, 297-301 DOI: 10.17660/ActaHortic.2004.662.43Tian Z. et al. Factors Affecting Embryonic-Axis Culture and Regeneration of Early-maturity Nectarine (Prunus persica var. nectarina). Acta Botanica Boreali-occidentalia Sinica. 2005;25(7):1452.Tian Z. et al. Factors Affecting Embryonic-Axis Culture and Regeneration of Early-maturity Nectarine (Prunus persica var. nectarina). Acta Botanica Boreali-occidentalia Sinica. 2005;25(7):1452.Sinclair J. W., Byrne D. H. Improvement of peach embryo culture through manipulation of carbohydrate source and pH. HortScience. 2003;38(4):582-585. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.38.4.582.Sinclair J. W., Byrne D. H. Improvement of peach embryo culture through manipulation of carbohydrate source and pH. HortScience. 2003;38(4):582-585. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.38.4.582.Krishna B., Arora J., Arora R. L. Embryo rescue: An approch to recover plantlets in early maturing subtropical peach. Indian Journal of Horticulture. 2004;61(3):199-205.Krishna B., Arora J., Arora R. L. Embryo rescue: An approch to recover plantlets in early maturing subtropical peach. Indian Journal of Horticulture. 2004;61(3):199-205.Sundouri A. S. et al. In-vitro germination of hybrid embryo rescued from low chill peaches as affected by stratification period and embryo age. Indian Journal of Horticulture. 2014;71(2):151-155.Sundouri A. S. et al. In-vitro germination of hybrid embryo rescued from low chill peaches as affected by stratification period and embryo age. Indian Journal of Horticulture. 2014;71(2):151-155.Острикова О. В., Федотова И. Э., Хархардина Е. Л. Изучение влияния гормонального состава питательной среды на морфогенез зародышей абрикоса обыкновенного в культуре in vitro. Селекция и сорторазведение садовых культур. 2018;5(1):93-96.Ostrikova O. V., Fedotova I. E., Kharkhardina E. L. Studying of the nutrient medium hormonal composition influence on the morphogenesis of apricot embryos in vitro culture. Breeding and variety breeding of horticultural crops. 2018;5(1):93-96. (In Russ.)Yildirim H. et al. In vitro embryo culture of apricot, Prunus armeniaca L. cv. Hacıhaliloğlu. International Journal of Science & Technology. 2007;2(2):99-104.Yildirim H. et al. In vitro embryo culture of apricot, Prunus armeniaca L. cv. Hacıhaliloğlu. International Journal of Science & Technology. 2007;2(2):99-104.Burgos L., Ledbetter C. A. Improved efficiency in apricot breeding: Effects of embryo development and nutrient media on in vitro germination and seedling establishment. Plant cell, tissue and organ culture. 1993;35:217-222. https://doi.org/10.1080/14620316.1995.11515270Burgos L., Ledbetter C. A. Improved efficiency in apricot breeding: Effects of embryo development and nutrient media on in vitro germination and seedling establishment. Plant cell, tissue and organ culture. 1993;35:217-222. https://doi.org/10.1080/14620316.1995.11515270Trajkova F., Koleva Gudeva L., Mitrev S. Zygotic embryos culture from apricot (Prunus armeniaca L.). Yearbook, Faculty of Agriculture, Goce Delcev University-Stip. 2015;13:39-48.Trajkova F., Koleva Gudeva L., Mitrev S. Zygotic embryos culture from apricot (Prunus armeniaca L.). Yearbook, Faculty of Agriculture, Goce Delcev University-Stip. 2015;13:39-48.Gercheva P., Zhivondov A. Embryo rescue of early ripening plum cultivars. VII International Symposium on Plum and Prune Genetics, Breeding and Pomology 577. 2001, 165-168. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.577.26Gercheva P., Zhivondov A. Embryo rescue of early ripening plum cultivars. VII International Symposium on Plum and Prune Genetics, Breeding and Pomology 577. 2001, 165-168. DOI: 10.17660/ActaHortic.2002.577.26Pugachov R. M. et al. Influence of mineral and hormonal composition of nutrient medium on prune, cherry plum and sloe embryos germination and growing in vitro. Sodininkystė ir Daržininkystė. 2000;19(3):454-463Pugachov R. M. et al. Influence of mineral and hormonal composition of nutrient medium on prune, cherry plum and sloe embryos germination and growing in vitro. Sodininkystė ir Daržininkystė. 2000;19(3):454-463Arbeloa A. et al. In vitro culture of ‘Myrobalan’ (Prunus cerasifera Ehrh.) embryos. HortScience. 2009;44(6):1672-1674. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.44.6.1672Arbeloa A. et al. In vitro culture of ‘Myrobalan’ (Prunus cerasifera Ehrh.) embryos. HortScience. 2009;44(6):1672-1674. https://doi.org/10.21273/HORTSCI.44.6.1672Саенко И. Н. Эмбриокультура нектарина и алычи в связи с задачами селекции. Биология растений и садоводство: теория, инновации. 2005;125: 131-145.Saenko I. N. Embryoculture of cherr-plum and nectarine in the connection with the aims of selection. Plant Biology and Horticulture: theory, innovation. 2005;125: 131-145. (In Russ.)Burmenko J., Simonov V., Vysotsky V. The Role Of Inter-Species Hybridization In Expanding The Sortiment Of Plum. 1st International Symposium Innovations in Life Sciences (ISILS 2019). Atlantis Press. 2019, 176-179.Burmenko J., Simonov V., Vysotsky V. The Role Of Inter-Species Hybridization In Expanding The Sortiment Of Plum. 1st International Symposium Innovations in Life Sciences (ISILS 2019). Atlantis Press. 2019, 176-179.Sallom A. et al. Optimization in vitro conditions for plum×apricot embryo rescue and modeling some critical factors by using artificial neural networks technology. Scientia Horticulturae. 2021;289:110487. https://doi.org/10.1016/j.scienta.2021.110487Sallom A. et al. Optimization in vitro conditions for plum×apricot embryo rescue and modeling some critical factors by using artificial neural networks technology. Scientia Horticulturae. 2021;289:110487. https://doi.org/10.1016/j.scienta.2021.110487Daorden Álvarez M. E., Marín Velázquez J. A., Arbeloa Matute A. Germinación in vitro de embriones inmaduros a distintas temperaturas de estratificación. 2002.Daorden Álvarez M. E., Marín Velázquez J. A., Arbeloa Matute A. Germinación in vitro de embriones inmaduros a distintas temperaturas de estratificación. 2002.Коваленко Н. Н., Гладких С. В. Культивирование зародышей in vitro гибридов раносозревающих сортов черешни (Prunus avium L.). Вавиловский журнал генетики и селекции. 2019;23(6):765-771. DOI 10.18699/VJ19.550Kovalenko N. N., Gladkikh S. V. In vitro cultivation of the embryos of hybrid forms of early-ripening sweet cherry (Prunus avium L.) varieties. Vavilov journal of genetics and breeding. 2019;23(6):765-771. (In Russ.) DOI 10.18699/VJ19.550Бунцевич Л. Л. и др. Эмбриокультура в селекции вишни и черешни. Плодоводство и виноградарство Юга России. 2014;27:23-29.Buntsevich L. L. et. al. The embryos techniques in the breeding of cherries and sweet cherries. Fruit growing and viticulture of South Russia. 2014;27:23-29. (In Russ.)Токмаков С. В. и др. Влияние коротких периодов стратификации на развитие изолированных незрелых эмбрионов черешни в культуре in vitro. Плодоводство и виноградарство юга России. 2019;60:91-101. DOI 10.30679/2219-5335-2019-6-60-91-101Tokmakov S. V. et. al. The influence of short stratification periods the development of isolated unmatural embryons in vitro culture. Fruit growing and viticulture of South Russia. 2019;60:91-101. (In Russ.) DOI 10.30679/2219-5335-2019-6-60-91-101Коваленко Н. Н., Поливара Н. В. Влияние сроков изоляции зародышей на выход сеянцев сортов вишни обыкновенной при культивировании in vitro. Биотехнология и селекция растений. 2021;4(1):25-35. DOI: 10.30901/2658-6266-2021-1-o3Kovalenko N. N., Polivara N. V. Effect of the timing of embryo isolation on the output of seedlings of sour cherry varieties when cultivated in vitro. Plant Biotechnology and Breeding. 2021;4(1):25-35. (In Russ.) DOI: 10.30901/2658–6266-2021-1-o3Коваленко Н. Н. Оценка питательных сред на пригодность к культивированию зародышей вишни обыкновенной (Cerasus vulgaris Mill.). Плодоводство и виноградарство Юга России. 2019;59:49-64. DOI: 10.30679/2219-53352019-5-59-49-64Kovalenko N. N. Evaluation of nutrient media on suitability for cultivation of cherry ordinary germs (Cerasus vulgaris Mill.). Fruit growing and viticulture of South Russia. 2019;59:49-64. (In Russ.) DOI: 10.30679/2219-5335-2019-5-59-49-64Федотова И. Э. и др. Влияние регуляторов роста на жизнеспособность и интенсивность развития зародышей вишни в культуре in vitro. Актуальные проблемы естественнонаучного образования, защиты окружающей среды и здоровья человека. 2016;4(4):396-400.Fedotova I. E. et. al. The influence of growth regulators on the viability and intensity of development of cherry embryos in in vitro culture. Current problems of science education, environmental protection, and human health. 2016;4(4):396-400. (In Russ.)Коваленко Н. Н., Поливара Н. В. Оптимизация питательных сред для культивирования in vitro зародышей из гибридов рода Cerasus Mill. Плодоводство и ягодоводство России. 2017;49:161-168.Kovalenko N. N., Polivara N. V. Optimization of culture media for the in vitro culture of germs of hybrids of Cerasus Mill. Pomiculture and small fruits culture in Russia. 2017;49:161-168 (In Russ.)Коваленко Н. Н., Гладких С. В. Получение исходного селекционного материала сортов вишни, черешни и её отдаленных гибридов на основе использования культуры зародышей in vitro. Научные труды Северо-Кавказского федерального научного центра садоводства, виноградарства, виноделия. 2018;14:108-114. DOI: 10.30679/2587-9847-2018-14-108-114Kovalenko N. N., Gladkikh S. V. Obtaining the initial breeding material of cherry, sweet cherry varieties and its remote hybrids by using of embryo culture in vitro. Scientific works of the North Caucasus Federal Scientific Center for Horticulture, Viticulture and Winemaking. 2018,14:108-114. (In Russ.) DOI: 10.30679/2587-9847-2018-14-108-114Атлас сортов плодовых культур коллекции Никитского ботанического сада. Атлас. Симфирополь: ИТ «Ариал», 2018, 400 с.Atlas of varieties of fruit crops from the collection of the Nikitsky Botanical Garden. Atlas. Simfiropol: IT «Arial», 2018, 400 p. (In Russ.)

The authors declare that there are no conflicts of interest present.