vstispСадоводство и виноградарствоHorticulture and viticulture0235-25912618-9003Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»10.31676/0235-2591-2024-1-12-23vyucuwvstisp-1120Research ArticleГЕНЕТИКА, СЕЛЕКЦИЯ, СЕМЕНОВОДСТВОGENETICS, BREEDING, SEED PRODUCTIONКомплексная фенотипическая оценка по признакам качества плодов и анализ генетического разнообразия перспективных элитных форм ореха грецкого селекции ФГБНУ СКФНЦСВВComprehensive phenotypic evaluation by fruit quality traits and analysis of the genetic diversity of promising elite walnut forms bred in the North Caucasian Federal Scientific Center of Horticulture, Viticulture, and WinemakingАль-НакибЕ. А.Al-NakibE. A.

Екатерина Аделевна Аль-Накиб, аспирант, младший научный сотрудник

cелекционно-биотехнологическая лаборатория

350901; ул. им. 40-летия Победы, 39; Краснодар

Ekaterina A. Al-Nakib, Graduate Student, Junior Researcher

Breeding and Biotechnology Laboratory

350901; 40th Anniversary of Victory str., 39; Krasnodar

supruni@mail.ruСеверо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделияРоссияNorth Caucasian Federal Scientific Center of Horticulture, Viticulture, Wine-makingRussian Federation202414032024011223Copyright © Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture», 20242024Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»https://www.sadivin.com/jour/about/submissions#copyrightNoticehttps://www.sadivin.com/jour/article/view/1120

   Грецкий орех является источником полезных питательных веществ (жирные кислоты, витамины, фенольные соединения) и имеет высокую калорийность. В селекции этой культуры одним из ключевых направлений является отбор на качество плодов. Современный сорт должен соответствовать стандартам внешнего вида плода (крупноплодность, светлый цвет ядра, округлая форма, легкая выделяемость ядра). Не менее актуально изучение генетической структуры коллекций ореха грецкого с помощью микросателлитных маркеров.

   Целью представленной работы является комплексная оценка хозяйственно ценных признаков плодов и анализ генетического разнообразия перспективных элитных форм ореха грецкого селекции ФГБНУ СКФНЦСВВ с использованием микросателлитных ДНК-маркеров.

   Морфологическую оценку плодов проводили по 13 признакам, биохимический анализ включал общий анализ содержания жиров, фенольных соединений, макроэлементов (Na, K, Mg, Ca) и водорастворимых сухих веществ. Молекулярно-генетический анализ проводили с использованием восьми SSR-маркеров: WGA001, WGA069, WGA376, WGA276, WGA009, WGA202, WGA089, WGA321. В результате комплексной фенотипической и биохимической оценки плодов выделены элитные формы, превосходящие сорт-контроль: масса плода – 17-1-18 (13,36 г), МП-82 (14,80 г), ЯБ-18 (13,47 г); содержание ядра – 17-2-23 (61,24 %), 17-5-5 (58,49 %), 17-2-16 (57,7 %); содержание жиров – МП-34 (68 %), 17-1-18 (61 %), 17-2-16 (62 %), МП-39 (60 %), ЯБ-5 (60 %). Микросателлитный анализ выявил среднее значение аллелей на локус, равное 7,13, что говорит о высоком уровне генетической гетерогенности изученной выборки элитных форм. В результате UPGMA и PCoA анализов было установлено наличие двух генетически отличных групп. К первой отнесены крупноплодные образцы, превосходящие контроль по массе плода (МП-82, ЯБ-18). Во второй группе преобладали высокомасличные формы с высоким процентом выхода ядра (17-1-18, ЯБ-5, 17-2-23, 17-2-16, МП-39, МП-34, 17-5-5), формы с хорошей выделяемостью ядра (17-2-5, 17-2-16, 17-5-5, 17-5-10, МП-39, МП-67, МП-69 и МП-170). Это позволяет сделать вывод о перспективности скрещивания генетически удаленных форм не только для решения селекционных задач, но также в целях сохранения и повышения генетической гетерогенности селекционного генофонда ореха грецкого.

   Walnuts are a source of benefi cial nutrients (fatty acids, vitamins, phenolic compounds) and are high in calories. In the breeding of this cultivated plant, one of the key areas is selection for fruit quality. A modern cultivar must meet the standards of fruit appearance (large fruit, light kernel color, round shape, easy shell-kernel separation). The study of the genetic structure of walnut collections using microsatellite markers is no less relevant.

   The article aims to comprehensively evaluate the economically valuable traits of fruits and analyze the genetic diversity of promising elite walnut forms bred by the North Caucasian Federal Scientific Center of Horticulture, Viticulture, and Winemaking employing microsatellite DNA markers.

   Morphological fruit evaluation was carried out according to 13 traits. The biochemical analysis included total fat content, phenolic compounds, macronutrients (Na, K, Mg, Ca), and water-soluble solids. The molecular genetic analysis was performed using eight SSR markers: WGA001, WGA069, WGA376, WGA276, WGA009, WGA202, WGA089, WGA321. The comprehensive phenotypic and biochemical evaluation of fruits resulted in the identifi cation of elite forms superior to the check cultivar. For these elite forms, the fruit weight was 17-1-18 (13.36 g), MP-82 (14.80 g), YaB-18 (13.47 g); the kernel content was 17-2-23 (61.24 %), 17-5-5 (58.49 %), 17-2-16 (57.7 %); the fat content – MP-34 (68 %), 17-1-18 (61 %), 17-2-16 (62 %), MP-39 (60 %), YaB-5 (60 %). The microsatellite analysis revealed an average allele value per locus of 7.13, which indicates a high level of genetic heterogeneity in the studied sample of elite forms. Using the UPGMA clustering method and PCoA analysis, we revealed the presence of two genetically distinct groups. Th e first one includes large-fruited samples that exceed the check cultivar in terms of fruit weight (MP-82, YaB-18). In the second group, high-oil-bearing forms with a large percentage of kernel yield (17-1-18, YaB-5, 17-2-23, 17-2-16, MP-39, MP-34, 17-5-5) and forms with good shell-kernel separation (17-2-5, 17-2-16, 17-5-5, 17-5-10, MP-39, MP-67, MP-69, MP-170) predominated. Th us, it can be concluded that crossing genetically distant forms is promising not only for solving breeding issues, but also for preserving and increasing the genetic heterogeneity of the breeding walnut gene pool.

орех грецкийкачество плодовбиохимический анализ плодовселекция грецкого орехагенетическое разнообразиеSSR-маркерыwalnutfruit qualitybiochemical fruit analysiswalnut breedinggenetic diversitySSR markersИсследование выполнено за счет средств гранта Российского научного фонда и Кубанского научного фонда № 22-16-20061, https://rscf.ru/en/project/22-16-20061/The research was funded by the Russian Science Foundation and the Kuban Science Foundation, grant No. 22-16-20061, https://rscf.ru/en/project/22-16-20061/ReferencesFAO (2022). Statistical Yearbook “World Food and Agriculture” - 2022 [electronic resource] // Food and Agriculture Organization of the United Nations. https://www.fao.org/documents/card/en/c/cc2211en (access date: 09/10/2023).FAO (2022). Statistical Yearbook “World Food and Agriculture” - 2022 [electronic resource] // Food and Agriculture Organization of the United Nations. https://www.fao.org/documents/card/en/c/cc2211en (access date: 09/10/2023).Корниенко П. С. Сравнительный анализ состояния и распространения ореха грецкого в мире, а также проблематика его возделывания в России. Известия сельскохозяйственной науки Тавриды. 2022;29(192): 46-58.Kornienko P. S. Comparative analysis of the state and distribution of walnuts in the world, as well as the problems of its cultivation in Russia. News of Agricultural Science of Tavrida. 2022;29(192): 46-58. (In Russ.).Щепотьев Ф. Л., Рихтер А. А., Павленко Ф. А. Орехоплодные лесные и садовые культуры. М.: Агропромиздат, 1985, 244 с.Shchepotyev F. L., Richter A. A., Pavlenko F. A. Nut-bearing forest and garden crops. M.: Agropromizdat, 1985, 244 p. (In Russ.).Erdoğan Ü., Argin S., Turan M., Çakmakçı R., Olgun M. Biochemical and bioactive content in fruits of walnut (Juglans Regia L.) genotypes from Turkey. Fresenius Environmental Bulletin. 2021;30(6A):6713-6727.Erdoğan Ü., Argin S., Turan M., Çakmakçı R., Olgun M. Biochemical and bioactive content in fruits of walnut (Juglans Regia L.) genotypes from Turkey. Fresenius Environmental Bulletin. 2021;30(6A):6713-6727.Sarikhani S., Vahdati K., Ligterink W. Biochemical properities of superior Persian walnut genopyes originated from Southwest of Iran, International journal of horticultural science and technology. 2021;8(1):13-24. doi: 10.22059/ijhst.2020.309363.392.Sarikhani S., Vahdati K., Ligterink W. Biochemical properities of superior Persian walnut genopyes originated from Southwest of Iran, International journal of horticultural science and technology. 2021;8(1):13-24. doi: 10.22059/ijhst.2020.309363.392.Leahu A., Damian C., Orolan M., Hretcanu C. E. Estimation of biochemical properties of walnuts from the region of Suceava-Romania. Food and Environment Safety Journal. 2016;12(2).Leahu A., Damian C., Orolan M., Hretcanu C. E. Estimation of biochemical properties of walnuts from the region of Suceava-Romania. Food and Environment Safety Journal. 2016;12(2).Bizera M., Giura S., Scutelnicu A., Preda S., Botu M., Vijan L. Physico-Chemical Characterization of some Walnut Fruits Collected in 2018 from University of Craiova-SCDP Vâlcea, România, Current Trends in Natural Sciences. 2019;8(15):169-178.Bizera M., Giura S., Scutelnicu A., Preda S., Botu M., Vijan L. Physico-Chemical Characterization of some Walnut Fruits Collected in 2018 from University of Craiova-SCDP Vâlcea, România, Current Trends in Natural Sciences. 2019;8(15):169-178.Slatnar A., Mikulic-Petkovsek M., Stampar F., Veberic R., Solar A. Identification and quantification of phenolic compounds in kernels, oil and bagasse pellets of common walnut (Juglans regia L.). Food Research International. 2015;67:255-263. doi: 10.1016/j.foodres.2014.11.016Slatnar A., Mikulic-Petkovsek M., Stampar F., Veberic R., Solar A. Identification and quantification of phenolic compounds in kernels, oil and bagasse pellets of common walnut (Juglans regia L.). Food Research International. 2015;67:255-263. doi: 10.1016/j.foodres.2014.11.016Okatan V., Gündeşli M. A., Kafkas N. E. Phenolic compounds, antioxidant Aactivity, fatty acids and volatile profi les of 18 different walnut (Juglans regia L.) cultivars and genotypes, Erwerbs-Obstbau. 2022;64:247–260. doi: 10.1007/s10341-021-00633-y.Okatan V., Gündeşli M. A., Kafkas N. E. Phenolic compounds, antioxidant Aactivity, fatty acids and volatile profi les of 18 different walnut (Juglans regia L.) cultivars and genotypes, Erwerbs-Obstbau. 2022;64:247–260. doi: 10.1007/s10341-021-00633-y.Shah U.N., Mir J.I., Ahmed N.Bioeffi cacy potential of different genotypes of walnut Juglans regia L., J Food Sci Technol. 2018;55:605–618. doi: 10.1007/s13197-017-2970-4Shah U.N., Mir J.I., Ahmed N.Bioeffi cacy potential of different genotypes of walnut Juglans regia L., J Food Sci Technol. 2018;55:605–618. doi: 10.1007/s13197-017-2970-4Kornsteiner M., Wagner K.-H., Elmadfa I. Tocopherols and total phenolics in 10 different nut types, Food Chemistry. 2006;98(2), 2006:381-387. doi: 10.1016/J.FOODCHEM.2005.07.033Kornsteiner M., Wagner K.-H., Elmadfa I. Tocopherols and total phenolics in 10 different nut types, Food Chemistry. 2006;98(2), 2006:381-387. doi: 10.1016/J.FOODCHEM.2005.07.033Gharibzahedi S. M. T., Mousavi S. M., Hamedi M. et al. Determination and characterization of kernel biochemical composition and functional compounds of Persian walnut oil, J Food Sci Techno. 2014;l 51:34–42 doi: 10.1007/s13197-011-0481-2.Gharibzahedi S. M. T., Mousavi S. M., Hamedi M. et al. Determination and characterization of kernel biochemical composition and functional compounds of Persian walnut oil, J Food Sci Techno. 2014;l 51:34–42 doi: 10.1007/s13197-011-0481-2.Cosmulescu S. N., Baciu A., Achim G., Mihai B. O. T. U., Trandafir I. Mineral composition of fruits in diff erent walnut (Juglans regia L.) cultivars, Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca. 2009;37(2):156-160. URL: https://www.researchgate.net/publication/40424140_Mineral_Composition_of_Fruits_in_Different_Walnut_Juglans_regia_L_Cultivars.Cosmulescu S. N., Baciu A., Achim G., Mihai B. O. T. U., Trandafir I. Mineral composition of fruits in diff erent walnut (Juglans regia L.) cultivars, Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca. 2009;37(2):156-160. URL: https://www.researchgate.net/publication/40424140_Mineral_Composition_of_Fruits_in_Different_Walnut_Juglans_regia_L_Cultivars.Kazankaya A., Koyuncu M. A., Koyuncu F., Yarilgac T. Sen S. M. Some nut properties of walnuts (Juglans Regia l.) of edremit country, Acta Hortic. 2001;544:97-100. DOI: 10.17660/ActaHortic.2001.544.11.Kazankaya A., Koyuncu M. A., Koyuncu F., Yarilgac T. Sen S. M. Some nut properties of walnuts (Juglans Regia l.) of edremit country, Acta Hortic. 2001;544:97-100. DOI: 10.17660/ActaHortic.2001.544.11.Arzani K. et al. Morphological variation among Persian walnut (Juglans regia) genotypes from central Iran, New Zealand Journal of Crop and Horticultural Science. 2008;36:159-168. doi: 10.1080/01140670809510232.Arzani K. et al. Morphological variation among Persian walnut (Juglans regia) genotypes from central Iran, New Zealand Journal of Crop and Horticultural Science. 2008;36:159-168. doi: 10.1080/01140670809510232.Фелалиев А. С., Шомамадова З. Д., Махрамов А. М. Некоторые морфобиологические и биохимические показатели плодов перспективных местных форм ореха грецкого (Juglans regia l.), Доклады Академии наук Республики Таджикистан. 2018;61(7-8):674-67.Felaliev A. S., Shomamadova Z. D., Makhramov A. M. Some morphobiological and biochemical indicators of fruits of promising local forms of walnut (Juglans regia l.), Reports of the Academy of Sciences of the Republic of Tajikistan. 2018;61(7-8):674-67. (In Russ.)Хохлов С. Ю. Изучение морфологической изменчивости плодов и оценка перспективных сортов ореха грецкого, Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2017;67: 273-277.Khokhlov S. Yu. Study of morphological variability of fruits and assessment of promising walnut varieties, Proceedings of the Kuban State Agrarian University. 2017;67: 273-277. (In Russ.)Берзегова А. А. Химический состав плодов грецкого ореха, Новые технологии. 2007;4:42-43.Berzegova A. A. Chemical composition of walnut fruits, New technologies. 2007;4:42-43. (In Russ.)Славский В. А., Николаев Е. А., Тимащук Д. А. Оценочные критерии качества плодов ореха грецкого в Центральном Черноземье, Лесотехнический журнал. 2015;5(20):58-66.Slavsky V. A., Nikolaev E. A., Timashchuk D. A. Evaluation criteria for the quality of walnut fruits in the Central Black Earth Region, Forestry Journal. 2015;5(20):58-66. (In Russ.)Супрун И. И., Аль-Накиб Е. А., Семенова М. Н. Оценка перспективных интродукционных форм ореха грецкого по комплексу хозяйственно ценных признаков, Плодоводство и виноградарство Юга России. 2022; 78(6):219-234. DOI: 10.30679/2219-5335-2022-6-78-219-234.Suprun I. I., Al-Nakib E. A., Semenova M. N. Assessment of promising introduction forms of walnut based on a complex of economically valuable traits, Fruit growing and viticulture of the South of Russia. 2022; 78(6):219-234. DOI: 10.30679/2219-5335-2022-6-78-219-234. (In Russ.).Артюхова Л. В., Якуба Ю. Ф., Балапанов И. М. Оценка перспективных форм ореха грецкого селекции СКФНЦСВВ по качеству плодов, Плодоводство и виноградарство Юга России. 2021;№67(1):55-65. DOI: 10.30679/2219-5335-2021-1-67-55-65. – EDN GVEOIT.Artyukhova L.V., Yakuba Yu.F., Balapanov I.M. Evaluation of promising forms of walnut selection NCFSCHVW for fruit quality, Frui t growing and viticulture of the South of Russia. 2021;No.67(1):55-65. DOI: 10.30679/2219-5335-2021-1-67-55-65. – EDN GVEOIT. (In Russ.).Егоров Е. А., Еремин Г. В., Сухоруких Ю. И. Современные методологические аспекты организации селекционного процесса в садоводстве и виноградарстве. Краснодар: СКЗНИИСиВ Россельхозакадемии, 2012, 569 с.Egorov E. A., Eremin G. V., Sukhorukikh Yu. I. Modern methodological aspects of organizing the selection process in horticulture and viticulture. Krasnodar: SKZNIISiV of Russian academy of agricultural sciences, 2012, 569 p. (In Russ.).Биганова С. Г., Сухоруких Ю. И., Луговской А. П. Современные тенденции селекции ореха грецкого в России, Современные проблемы науки и образования. 2015; 2: 531-531.Biganova S. G., Sukhorukikh Yu. I., Lugovskoy A. P. Current trends in walnut breeding in Russia, Modern problems of science and education. 2015; 2: 531-531. (In Russ.).Луговской А. П., Супрун И. И., Балапанов И. М., Подгорная М. Е. Современные сорта и технологии возделывания грецкого ореха в условиях юга России : методические рекомендации. Краснодар: ФГБНУ СКФНЦСВВ, 2018, 69 с.Lugovskoy A.P., Suprun I.I., Balapanov I.M., Podgornaya M.E. Modern varieties and technologies for cultivating walnuts in the south of Russia: methodological recommendations. Krasnodar: FSBSI NCFSCHVW, 2018, 69 p.(In Russ.)Bernard A., Barreneche T., Lheureux F., Dirlewanger E. Analysis of genetic diversity and structure in a worldwide walnut (Juglans regia L.) germplasm using SSR markers, PLoS ONE. 2018;13(11): e0208021. URL: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0208021.Bernard A., Barreneche T., Lheureux F., Dirlewanger E. Analysis of genetic diversity and structure in a worldwide walnut (Juglans regia L.) germplasm using SSR markers, PLoS ONE. 2018;13(11): e0208021. URL: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0208021.Orhan E., Eyduran S., Poljuha D., Akın M., Weber T., Ercişli S.. Genetic diversity detection of seed-propagated walnut (Juglans regia L.) germ plasm from Eastern Anatolia using SSR markers, Folia Horticulturae. 2020;32(1). DOI: 10.2478/fhort-2020-0004Orhan E., Eyduran S., Poljuha D., Akın M., Weber T., Ercişli S.. Genetic diversity detection of seed-propagated walnut (Juglans regia L.) germ plasm from Eastern Anatolia using SSR markers, Folia Horticulturae. 2020;32(1). DOI: 10.2478/fhort-2020-0004Yildiz E., Pinar H., Uzun A., Yaman M., Sumbul A., Ercisli S. Identifi cation of genetic diversity among Juglans regia L. genotypes using molecular, morphological, and fatty acid data, Genetic Resources and Crop Evolution. 2021; 68:1425-1437. doi: 10.1007/s10722-020-01072-6Yildiz E., Pinar H., Uzun A., Yaman M., Sumbul A., Ercisli S. Identifi cation of genetic diversity among Juglans regia L. genotypes using molecular, morphological, and fatty acid data, Genetic Resources and Crop Evolution. 2021; 68:1425-1437. doi: 10.1007/s10722-020-01072-6Mahmoodi R., Dadpour M. R., Hassani D., Zeinalabedini M., Vendramin E., Leslie C. A. Composite core set construction and diversity analysis of Iranian walnut germplasm using molecular markers and phenotypic traits., PLoS One. 2021; 16(3):e0248623. URL: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0248623Mahmoodi R., Dadpour M. R., Hassani D., Zeinalabedini M., Vendramin E., Leslie C. A. Composite core set construction and diversity analysis of Iranian walnut germplasm using molecular markers and phenotypic traits., PLoS One. 2021; 16(3):e0248623. URL: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0248623Abbasi Holasou H., Mohammadzadeh Jalaly, H., Mohammadi R., Panahi B. Genetic diversity and structure of superior spring frost tolerant genotypes of Persian walnut (Juglans regia L.) in East Azerbaijan province of Iran, characterized using inter simple sequence repeat (ISSR) markers, Genetic Resources and Crop Evolution.2023;70(2):539-548. doi: 10.1007/s10722-022-01445-zAbbasi Holasou H., Mohammadzadeh Jalaly, H., Mohammadi R., Panahi B. Genetic diversity and structure of superior spring frost tolerant genotypes of Persian walnut (Juglans regia L.) in East Azerbaijan province of Iran, characterized using inter simple sequence repeat (ISSR) markers, Genetic Resources and Crop Evolution.2023;70(2):539-548. doi: 10.1007/s10722-022-01445-zСухоруких Ю. И., Луговской А. П., Биганова С.Г. Программа и методика сортоизучения плодовых, ягодных и орехоплодных культур. Орёл: ВНИИСПК, 1999, 608 с.Sukhorukikh Yu.I., Lugovskoy A.P., Biganova S.G. Program and methodology for the study of fruit, berry and nut crops. Orel: VNIISPK, 1999, 608 p. (In Russ.).Программа и методика селекции плодовых, ягодных и орехоплодных культур. Орёл: ВНИИСПК, 1995. 504 с.Program and methodology for breeding fruit, berry and nut crops. Orel: VNIISPK, 1995. 504 p. (In Russ.).Chatrabnous N., Yazdani N., Vahdati K. Determination of nutritional value and oxidative stability of fresh walnut, Journal of Nuts. 2018;№9(1):11-20. DOI:10.1016/j.foodres.2014.11.016.Chatrabnous N., Yazdani N., Vahdati K. Determination of nutritional value and oxidative stability of fresh walnut, Journal of Nuts. 2018;№9(1):11-20. DOI:10.1016/j.foodres.2014.11.016.Брыкало А. В. Применение капиллярного электрофореза и газовой хроматографии для исследования биологически активных соединений. Краснодар: КубГАУ, 2019. 120 с.Brykalo A. V. Application of capillary electrophoresis and gas chromatography for the study of biologically active compounds. Krasnodar: KubGAU, 2019. 120 p. (In Russ).ГОСТ ISO 2173-2013 Продукты переработки фруктов и овощей. Рефрактометрический метод определения растворимых сухих веществ.GOST ISO 2173-2013 Processed products of fruits and vegetables. Refractometric method for determining soluble solids. (In Russ.).Денисенко Т. А., Вишникин А. Б., Цыганок Л. П. Спектрофотометрическое определение суммы фенольных соединений в растительных объектах с использованием хлорида алюминия, 18-молибдодифосфата и реактива Фолина-Чокальтеу. Аналитика и контроль. 2015;19(4):373-380.Denisenko T. A., Vishnikin A. B., Tsyganok L. P. Spectrophotometric determination of the amount of phenolic compounds in plant objects using aluminum chloride, 18-molybdodiphosphate and the Folin-Ciocalteu reagent. Analytics and control. 2015;19(4):373-380. (In Russ.).Rogers S. O., Bendich A. J. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh, herbarium and mummifi ed plant tissues, Plant. Mol. Biol. 1985; 5:69–76. doi: 10.1007/BF00020088.Rogers S. O., Bendich A. J. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh, herbarium and mummifi ed plant tissues, Plant. Mol. Biol. 1985; 5:69–76. doi: 10.1007/BF00020088.Dangl G. S., Woeste K., Aradhya M. K., Koehmstedt A., Simon C., Potter D., Leslie C. A., McGranahan G. Characterization of 14 microsatellite markers for genetic analysis and cultivar identifi cation of walnut. Journal of the American Society for Horticultural Science. 2005;130(3):348-354. doi: 10.21273/JASHS.130.3.348.Dangl G. S., Woeste K., Aradhya M. K., Koehmstedt A., Simon C., Potter D., Leslie C. A., McGranahan G. Characterization of 14 microsatellite markers for genetic analysis and cultivar identifi cation of walnut. Journal of the American Society for Horticultural Science. 2005;130(3):348-354. doi: 10.21273/JASHS.130.3.348.Peakall R., Smouse P. E. GenAlEx 6.5: genetic analysis in Excel. Population genetic soft ware for teaching and research-an update, Bioinformatics. 2012;28:2537-2539. DOI: 10.1093/bioinformatics/bts460.Peakall R., Smouse P. E. GenAlEx 6.5: genetic analysis in Excel. Population genetic soft ware for teaching and research-an update, Bioinformatics. 2012;28:2537-2539. DOI: 10.1093/bioinformatics/bts460.Hammer O., Harper D. A. T., Ryan P. D. Past: paleontological statistics soft ware package for education and data analysis, Palaeontologia Electronica. 2001;4(1):1-9.Hammer O., Harper D. A. T., Ryan P. D. Past: paleontological statistics soft ware package for education and data analysis, Palaeontologia Electronica. 2001;4(1):1-9.Shamlu F., Rezaei M., Lawson S., Ebrahimi A., Biabani A., Khan-Ahmadi A. Genetic diversity of superior Persian walnut genotypes in Azadshahr, Iran. Physiology and Molecular Biology of Plants. 2018;24:939-949. DOI: 10.1007/s12298-018-0573-9.Shamlu F., Rezaei M., Lawson S., Ebrahimi A., Biabani A., Khan-Ahmadi A. Genetic diversity of superior Persian walnut genotypes in Azadshahr, Iran. Physiology and Molecular Biology of Plants. 2018;24:939-949. DOI: 10.1007/s12298-018-0573-9.Bozhuyuk M. R., Ercisli S., Orhan E., Koc A. Determination of the genetic diversity of walnut (Juglans regia L.) cultivar candidates from Northeastern Turkey using SSR markers, Mitt. Klost. 2020;70,269-277.Bozhuyuk M. R., Ercisli S., Orhan E., Koc A. Determination of the genetic diversity of walnut (Juglans regia L.) cultivar candidates from Northeastern Turkey using SSR markers, Mitt. Klost. 2020;70,269-277.Guney M., Kafkas S., Keles H., Zarifi khosroshahi M., Gundesli M. A., Ercisl S., Bujdoso G. Genetic diversity among some walnut (Juglans regia L.) genotypes by SSR markers. Sustainability. 2021;13(12),6830. DOI:10.3390/agronomy11040671.Guney M., Kafkas S., Keles H., Zarifi khosroshahi M., Gundesli M. A., Ercisl S., Bujdoso G. Genetic diversity among some walnut (Juglans regia L.) genotypes by SSR markers. Sustainability. 2021;13(12),6830. DOI:10.3390/agronomy11040671.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.