vstispСадоводство и виноградарствоHorticulture and viticulture0235-25912618-9003Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»10.25556/VSTISP.2018.2.12306vstisp-233Research ArticleЗАЩИТА РАСТЕНИЙPLANT PROTECTIONДиагностика вирусов плодовых и ягодных культур – важный этап в производстве сертифицированного посадочного материалаDiagnosis of viruses of fruit and small fruit crops is an important stage in the production of certified planting materialУпадышевМ. Т.UpadyshevM. M. T.

Главный научный сотрудник, доктор сельскохозяйственных наук, член-корреспондент РАН 

115598, г. Москва, ул. Загорьевская, 4 

vstisp@vstisp.orgФГБНУ ВСТИСПРоссияAll-Russian Horticultural Institute for Breeding, Agrotechnology and Nursery (ARHIBAN)Russian Federation201813102018024348Copyright © Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture», 20182018Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»Autonomous non-profit organization Editorial Board of journal «Horticulture and viticulture»https://www.sadivin.com/jour/about/submissions#copyrightNoticehttps://www.sadivin.com/jour/article/view/233

Вирусы являются опасными патогенами ягодных и плодовых культур. Распространенность вирусных болезней в условиях России варьирует от 32 до 80 % в зависимости от культуры. Основными путями решения проблемы оздоровления садовых культур от вирусов в России являются создание селекционнопитомниководческих центров и внедрение современной системы сертификации посадочного материала. Важной задачей селекционно-питомниководческих центров является диагностика вирусов. Диагностика проводится путем тестирования на индикаторах, серологическими, молекулярными методами, электронной микроскопией. В настоящее время все более широкое  применение  находят  методы ИФА и ПЦР. Современные методы диагностики вирусов должны отвечать требованиям высокой чувствительности, специфичности, достоверности, пригодности для массового тестирования образцов. Методы диагностики необходимо адаптировать к биологическим особенностям конкретных культур и видам вирусов. Для успешного тестирования большое значение имеют оптимальные сроки отбора и вид образцов, распределение вирусов по растению, состав экстрагирующего буфера, предотвращающий разрушение вирусов. Оптимальным сроком диагностики вирусов на ягодных и плодовых культурах методом ИФА в условиях открытого грунта средней полосы России является период со второй половины мая до конца июня. К преимуществу ПЦР относится возможность эффективной диагностики вирусов в тканях, находящихся в состоянии покоя растений. Совершенствование метода ПЦР должно проводиться в направлении повышения его производительности, сокращения этапов, упрощения и повышения эффективности процедур выделения нуклеиновых кислот из растительного материала. В настоящее время в ФГБНУ ВСТИСП проводится работа по оздоровлению и выделению свободных от вредоносных вирусов растений: за 2011-2017 гг. выполнено 16 тыс. анализов на вирусы и отобрано 3 тыс. свободных от вирусов растений. Диагностика вирусов на плодовых и ягодных культурах является одним из самых важных этапов в работе селекционно-питомниководческих центров.

Viruses are dangerous pathogens of fruit and small fruit crops. The prevalence of viral diseases in Russia varies from 32 to 80 % depending on the culture. The main ways to solve the problem of sanitation of horticultural crops from viruses in Russia are the creation of breeding and nursery centers and the introduction of a modern system of certification of planting material. An important task in breeding and nursery centers is to diagnose viruses. Diagnosis is carried out by testing on indicators, serological and molecular methods, electron microscopy. The methods of ELISA and PCR are now increasingly being used. Modern methods of virus diagnostics must meet the requirements of high sensitivity, specificity, reliability, suitability for mass testing of samples. Diagnostic methods need to be adapted to the biological characteristics of specific cultures and types of viruses. For successful testing, the optimal timing and type of samples, the distribution of viruses in the plant, the composition of the extractive buffer, preventing the destruction of viruses, are of great importance. The optimal period of diagnosis of viruses on fruit and small fruit crops by ELISA in open ground in Central Russia is the period from the second half of May to the end of June. The advantage of PCR is the possibility of effective diagnosis of the virus in the tissues in the rest of the plants. Improvement of the PCR method should be carried out in the direction of increasing its productivity, reducing the stages, simplifying and improving the efficiency of procedures for the release of nucleic acids from plant material. Currently, ARHIBAN is working on the sanitation and identification of plants free from malicious viruses: for 2011-2017 16 thousand analysis were made and 3 thousand of virus-free plants were selected. Diagnosis of viruses of fruit and small fruit crops is one of the most important stages in the breeding and nursery centers.

плодовые и ягодные культурысертифицированный посадочный материалвирусыдиагностикаиндикаторыИФАПЦРэлектронная микроскопияfruit and small fruit cropscertified planting materialvirusesdiagnosticsindicatorsELISAPCRelectron microscopyРоссийский фонд фундаментальных исследований (проект № 18-016-20002)ReferencesКуликов И. М., Упадышев М. Т. Пути решения проблем оздоровления садовых культур от вирусов // Защита и карантин растений, 2015. – № 4. – С. 10-12.Kulikov I. M., Upadyshev M. T. Puti resheniya problem ozdorovleniya sadovyh kul’tur ot virusov [Ways of solving problems of sanitation of horticultural crops from viruses], Zashchita i karantin rasteniy, 2015, No. 4, pp. 10-12. (in Russian).Упадышев М. Т., Метлицкая К. В., Петрова А. Д., Упадышева Г. Ю., Борисова А. А. Распространенность вредоносных вирусов в насаждениях плодовых культур в Подмосковье // Плодоводство и ягодоводство России, 2016. – Т. XXХХIV. – С. 228-233.Upadyshev M. T., Metlitskaya K. V., Petrova A. D., Upadysheva G. Yu., Borisova A. A. Rasprostranennost’ vredonosnyh virusov v nasazhdeniyah plodovyh kul’tur v Podmoskov’e [The prevalence of harmful viruses in plantations of fruit crops in the Moscow region], Plodovodstvo i yagodovodstvo Rossii, 2016, Vol. XXXXIV, pp. 228-233. (in Russian).Метлицкая К. В., Упадышев М. Т., Петрова А. Д., Упадышева Г. Ю. Мониторинг вредоносных вирусов в насаждениях вишни и черешни в Подмосковье // Плодоводство и ягодоводство России, 2016. – Т. XXХХVI. – С. 227-231.Metlitskaya K. V., Upadyshev M. T., Petrova A. D., Upadysheva G. Yu. Monitoring vredonosnyh virusov v nasazhdeniyah vishni i chereshni v Podmoskov’e [Monitoring of harmful viruses in cherry and sweet cherry plantations in the Moscow region], Plodovodstvo i yagodovodstvo Rossii, 2016, Vol. XXXXVI, pp. 227-231. (in Russian).Куликов И. М., Завражнов А. И., Упадышев М. Т., Борисова А. А., Тумаева Т. А. Научно-методические основы индустриальной агротехнологии производства сертифицированного посадочного материала плодовых и ягодных культур в Российской Федерации // Садоводство и виноградарство, 2018. – № 1. – С. 30-35.Kulikov I. M., Zavrazhnov A. I., Upadyshev M. T., Borisova A. A., Tumaeva T. A. Nauchno-metodicheskie osnovy industrial’noy agrotekhnologii proizvodstva sertifitsirovannogo posadochnogo materiala plodovyh i yagodnyh kul’tur v Rossiyskoy Federatsii [Scientific and methodical foundations of industrial agrotechnology for the production of certified planting stock of fruit and small fruit crops in the Russian Federation], Sadovodstvo i vinogradarstvo, 2018, No. 1, pp. 30-35. (in Russian).Куликов И. М., Малько А. М., Смирнова Л. А., Борисова А. А., Грачёва Т. А. Положение о базовом питомнике плодовых и ягодных культур. – М.: ФГБНУ ВСТИСП, 2018. – 13 с.Kulikov I. M., Mal’ko A. M., Smirnova L. A., Borisova A. A., Grachyova T. A. Polozhenie o bazovom pitomnike plodovyh i yagodnyh kul’tur. [Regulations on the basic nursery of fruit and small fruit crops], Moscow: FGBNU VSTISP, 2018, 13 pp. (in Russian).Упадышев М. Т., Метлицкая К. В., Донецких В. И., Борисова А. А., Селиванов В. Г., Пискунов О. А., Юдина С. Н. Технология получения оздоровленного от вирусов посадочного материала плодовых и ягодных культур: метод. указания. – М.: ФГБНУ «Росинформагротех», 2013. – 92 с.Upadyshev M. T., Metlickaya K. V., Donetskih V. I., Borisova A. A., Selivanov V. G., Piskunov O. A., Yudinа S. N. Tehnologiya polucheniya ozdorovlennogo ot virusov posadochnogo materiala plodovykh i yagodnyh kul’tur: metodicheskie ukazaniya [Technology of obtaining planting material healthy from viruses for fruit and small fruit crops: methodical instructions], Moscow: FGBNU «Rosinformagroteh», 2013, 92 p. (in Russian).Гиббс А., Харрисон Б. Основы вирусологии растений.– М.: Мир, 1978. – 429 с.Gibbs A., Harrison B. Osnovy virusologii rastenij [Fundamentals of plant virology], Moscow: Mir, 1978, 429 p. (in Russian).Семина Н. П. Изучение вирусных болезней яблони и груши в Средней зоне садоводства // Научные основы садоводства: тр. ВНИИС им. И. В. Мичурина. – Мичуринск, 2005. – С. 50-70.Semina N. P. Izuchenie virusnyh boleznej yabloni i grushi v Sredney zone sadovodstva [The study of viral diseases of apple and pear in the Middle horticulture zone], Nauchnye osnovy sadovodstva: tr. VNIIS im. I. V. Michurina, Michurinsk, 2005, pp. 50-70. (in Russian).Paduch-Cichal E., Szyndel M. S., Tomala K. Preliminary results of the study on viruses occurring in ‘Mutsu’ apple cultivar trees // Phytopathol. Pol., 2005. – Vol. 37. – P. 87-90.Paduch-Cichal E., Szyndel M.S., Tomala K. Preliminary results of the study on viruses occurring in ‘Mutsu’ apple cultivar trees, Phytopathol. Pol., 2005, Vol. 37, P. 87-90.Упадышев М. Т., Мельникова Н. Н., Петрова А. Д., Суркова О. Ю., Метлицкая К. В., Походенко П. А., Саунина И. И. Диагностика вирусов семечковых и косточковых культур методами ИФА и ПЦР. – М.: ГНУ ВСТИСП, 2008.– 35 с.Upadyshev M. T., Mel’nikova N. N., Petrova A. D., Surkova O. Yu., Metlickaya K. V., Pohodenko P. A., Saunina I. I. Diagnostika virusov semechkovyh i kostochkovyh kul’tur metodami IFA i PCR [Diagnosis of viruses of pome fruits and stone fruit crops using the methods of ELISA and PCR], Moscow: GNU VSTISP, 2008, 35 p. (in Russian).Упадышев М. Т. Вирусные болезни и современные методы оздоровления плодовых и ягодных культур: дисс.… д. с.-х. наук. – М., 2011. – 479 с.Upadyshev M. T. Virusnye bolezni i sovremennye metody ozdorovleniya plodovyh i yagodnyh kul’tur: dis. …d. s.-h. nauk [Viral diseases and modern methods of sanitation of fruit and small fruit crops: doctoral dissertation in agriculture], Moscow, 2011, 479 p. (in Russian).Jones A. T., McGavin W. J., Geering A., Lockhart B. E. L. Detection by PCR of viruses in Rubus and Ribes // Acta Hort., 2001. – № 551. – P. 59-64.Jones A. T., McGavin W. J., Geering A., Lockhart B. E. L. Detection by PCR of viruses in Rubus and Ribes, Acta Hort., 2001, № 551, pp. 59-64.Суркова О. Ю., Упадышев М. Т., Мельникова Н. Н., Походенко П. А. Применение полимеразной цепной реакции для диагностики реверсии на черной и красной смородине // Плодоводство и ягодоводство России, 2010. – Т. XXIV, ч. 2. – С. 113-118.Surkova O. Yu., Upadyshev M. T., Mel’nikova N. N., Pohodenko P. A. Primenenie polimeraznoy tsepnoy reaktsii dlya diagnostiki reversii na chernoy i krasnoy smorodine [The use of polymerase chain reaction for the diagnosis of reversion in black and red currant], Plodovodstvo i yagodovodstvo Rossii, 2010, Vol. XXIV, part 2, pp. 113-118. (in Russian).Vašková D. H., Špak J. Molecular detection and variability of Strawberry vein banding virus // Acta Hort., 2004. – № 656. – P. 33-38.Vašková D. H., Špak J. Molecular detection and variability of Strawberry vein banding virus, Acta Hort., 2004, No. 656, pp. 33-38.Патент РФ № 2389795. Способ экстракции РНК из растительных образцов / М. Т. Упадышев, П. А. Походенко, И. И. Саунина, заявл. 30.12.2008, опубл. 20.05.2010, Бюл. № 14. – 7 с.Patent RF No. 2389795. Sposob ehkstrakcii RNK iz rastitel’nyh obrazcov [Method for extracting RNA from plant samples], M. T. Upadyshev, P. A. Pohodenko, I. I. Saunina, zayavl. 30.12.2008, opubl. 20.05.2010, Byul. № 14, 7 p. (in Russian).Jelkmann W. Detection of virus and virus-like diseases of fruit trees // Acta Hort., 2004. – № 657. – Р. 575-591.Jelkmann W. Detection of virus and virus-like diseases of fruit trees, Acta Hort., 2004, No. 657, pp. 575-591.Jones A. T., Roberts I. M. Some newly described viruses occurring in Ribes species // Acta Hort., 1998. – № 471.– P. 79-86.Jones A. T., Roberts I. M. Some newly described viruses occurring in Ribes species, Acta Hort., 1998, No. 471, P. 79-86.Fránová J., Mráz I., Petrzik K., Spak J., Síp M., Bertaccini A., Erbenová M., Karesová R. The occurrence of Strawberry viruses and phytoplasmas in the Czech republic // Acta Hort., 2001. – № 551. – P. 81-86.Fránová J., Mráz I., Petrzik K., Spak J., Síp M., Bertaccini A., Erbenová M., Karesová R. The occurrence of Strawberry viruses and phytoplasmas in the Czech republic, Acta Hort., 2001, No. 551, pp. 81-86.Куликов И. М., Упадышев М. Т. Экономические аспекты технологического процесса оздоровления плодовых и ягодных культур от вирусов // Садоводство и виноградарство, 2017. – № 1. – С. 20-25.Kulikov I. M., Upadyshev M. T. Ekonomicheskie aspekty tekhnologicheskogo processa ozdorovleniya plodovyh i yagodnyh kul’tur ot virusov [Economic aspects of the technological process of sanitation of fruit and small fruit crops from viruses], Sadovodstvo i vinogradarstvo, 2017, No.1, pp. 20-25. (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.