Preview

Садоводство и виноградарство

Расширенный поиск
Доступ открыт Открытый доступ  Доступ закрыт Только для подписчиков

Влияние интерференционного замалчивания гена факторов инициации трансляции eIF(iso)G и eIF(iso)E на устойчивость формы клонового подвоя косточковых культур 146-2 и сливы домашней сорта Стартовая к вирусу шарки сливы

https://doi.org/10.31676/0235-2591-2022-3-45-57

Полный текст:

Аннотация

Для получения устойчивых к вирусу шарки сливы (PPV) растений клонового подвоя 146-2 и промышленного сорта Стартовая использовался метод РНК-интерференционного сайленсинга генов. Для этого был создан вектор с самокомплементарными последовательностями фрагмента генов eIF (iso)4G и eIF(iso)E длиной 578 п.н. Гены eIF (iso)4G и eIF(iso)E кодируют факторы инициации трансляции, участвующие в жизненном цикле вируса шарки сливы. Для управления экспрессией шпильки был выбран сильный промотор гена рибулозо- 1,5-бисфосфаткарбоксилазы/оксигеназы (RuBisCo) в полном и укороченном вариантах. Успешная генетическая трансформация была проведена штаммом A. tumefaciens CBE21. В качестве источника эксплантата использовали целые листья побегов, культивируемых in vitro. Гены nptII и hpt, кодирующие неомицин II и гигромицин фосфотрансферазы, были использованы в качестве селектируемых маркеров растений. В наших экспериментах получено 5 независимых трансгенных линий подвоя 146-2 и сорта Стартовая, акклиматизированных в тепличных условиях. Их статус подтвержден ПЦР и Саузерн-блоттингом. Эффективность трансформации составила 0,3-0,4 %. Полученные растения были инфицированные PPV методом окулировки зараженных почек, устойчивость полученных растений оценивалась методом ELISA. Использование полноразмерного промотора гена малой субъединицы рибулозобифосфаткарбоксилазы (RBCS) при трансформации растений сорта Стартовая приводило к понижению жизнеспособности растений в случае супрессии гена eIF(iso)4E и обеспечивало устойчивость по крайней мере в первый год после инокуляции в случае супрессии гена eIF(iso)4G.

Об авторах

Л. Ю. Муренец
Филиал Института биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН
Россия

Муренец Л. Ю. — младший научный сотрудник

проспект Науки, 6, г. Пущино, Московская область, 142290



Т. Н. Сидорова
Филиал Института биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН; Никитский ботанический сад — Национальный научный центр РАН
Россия

Сидорова Т. Н. — младший научный сотрудник

проспект Науки, 6, г. Пущино, Московская область, 142290



В. Р. Тимербаев
Филиал Института биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН; Никитский ботанический сад — Национальный научный центр РАН
Россия

Тимербаев В. Р. — кандидат биологических наук, младший научный сотрудник

проспект Науки, 6, г. Пущино, Московская область, 142290



А. С. Пушин
Филиал Института биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН
Россия

Пушин А. С. — младший научный сотрудник

проспект Науки, 6, г. Пущино, Московская область, 142290



С. В. Долгов
Филиал Института биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН; Никитский ботанический сад — Национальный научный центр РАН; Федеральный научный селекционно-технологический центр садоводства и питомниководства
Россия

Долгов Сергей Владимирович — доктор биологических наук, главный научный сотрудник

проспект Науки, 6, г. Пущино, Московская область, 142290



Список литературы

1. Cambra M., Capote N., Myrta A., Llacer G. Plum pox virus and the estimated costs associated with sharka disease. Bull. OEPP. 2006;36(2):202-204.

2. Garcı́a J. A., Glasa M., Cambra M., Candresse T. Plum pox virus and sharka: a model potyvirus and a major disease. Mol. Plant Pathol. 2014;15(3):226-241.

3. Wang X., Kohalmi S. E., Svircev A., Wang A., Sanfaçon H., Tian L. Silencing of the Host Factor eIF(iso)4E Gene Confers Plum pox virus Resistance in Plum. PLoSONE. 2013;8:e50627.

4. Robaglia C., Caranta C. Translation initiation factors: weak link in plant RNA virus infection. Trends PlantSci. 2006;11:40-45.

5. Sanfaçon H. Plant translation factors and virus resistance. Viruses. 2015;7(7):3392-3419.

6. Mourenets L. Yu., Dolgov S. V. Adventitious shoot regeneration from leaf explants of two apricot rootstocks. Acta Hortic. 2016;1139:285-290.

7. Lazo G. R., Stein P. A., Ludwig R. A. A DNA transformation-competent Arabidopsis genomic library in Agrobacterium. Biotechnology (N. Y.) 1991;9(10):963-967.

8. Sidorova T., Mikhailov R., Pushin A., Miroshnichenko D., Dolgov S. V. A non-antibiotic selection strategy uses the phosphomannose-isomerase (PMI) gene and green fl uorescent protein (GFP) gene for Agrobacterium-mediated transformation of Prunus domestica L. leaf explants. Plant Cell Tissue Organ Cult. 2017;128(1):197-209.


Рецензия

Для цитирования:


Муренец Л.Ю., Сидорова Т.Н., Тимербаев В.Р., Пушин А.С., Долгов С.В. Влияние интерференционного замалчивания гена факторов инициации трансляции eIF(iso)G и eIF(iso)E на устойчивость формы клонового подвоя косточковых культур 146-2 и сливы домашней сорта Стартовая к вирусу шарки сливы. Садоводство и виноградарство. 2022;(3):45-57. https://doi.org/10.31676/0235-2591-2022-3-45-57

For citation:


Mourenets L.Yu., Sidorova T.N., Timerbaev V.R., Pushin A.S., Dolgov S.V. Infl uence of interference silencing of the gene of translation initiation factors eIF(iso)G and eIF(iso)E on the resistance of the clone stone fruits rootstock 146-2 and commercial plum variety Startovaya to the Plum pox virus. Horticulture and viticulture. 2022;(3):45-57. (In Russ.) https://doi.org/10.31676/0235-2591-2022-3-45-57

Просмотров: 33


ISSN 0235-2591 (Print)
ISSN 2618-9003 (Online)